LONZA支原體檢測試劑盒檢測原理
LONZA支原體檢測試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性,進行選擇性的生物化學(xué)檢測。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作,能靈敏地檢測出樣本中的支原體污染。這些存活的支原體被溶解,然后釋放出來的酶與支原體檢測試劑盒中提供的底物發(fā)生催化反應(yīng),將ADP轉(zhuǎn)化成ATP。通過測量樣品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一個比率,該比率指示支原體是否存在。如果這些酶不存在,第二次讀數(shù)相對于*次讀數(shù)就沒有增加;如果酶與底物進行特異性反應(yīng),就會導(dǎo)致ATP含量上升。ATP含量的上升通過生物發(fā)光化學(xué)反應(yīng)可以檢測到,其公式如下:Luciferase ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT這個反應(yīng)的發(fā)生是在室溫(18°C~22°C)進行的,也是熒光素酶反應(yīng)的*溫度。在支原體檢測試劑盒的檢測原理中,zui后通過分光光度計讀數(shù),由于發(fā)出光的強度與ATP的濃度成線性關(guān)系,因此可檢測支原體的污染問題。