支原體檢測試劑盒是一種基于聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR*)的檢測方法。檢測過程、快速、成本低、可信度高,適合用于細胞傳代培養(yǎng)流程中進行的常規(guī)性檢測。
高敏感度- 可檢測您樣品中極少量的支原體DNA。
特異性- 本試劑盒特異性的檢測超過25種“典型”支原體亞種。
可靠性- 本試劑盒中包括有內(nèi)對照DNA以及陽性對照DNA,可保證實驗結(jié)果的可重復(fù)性,減小因操作而帶來的誤差。
快速- 整個試驗流程可以在5小時左右完成。
通用性- 對于細胞試驗中常見的支原體污染,可以通過同樣的實驗流程進行檢測。
方便- 試劑盒中包含經(jīng)過優(yōu)化的PCR試劑,可以使檢測常規(guī)化。
易用- 可以直接用于檢測細胞培養(yǎng)物,不需要額外的去除抗生素或改變培養(yǎng)條件等工作。
樣品容易制備- 細胞培養(yǎng)物或其他樣品上清液經(jīng)煮沸處理可以直接作為PCR反應(yīng)模板。
結(jié)果容易分析- 通過電泳分析PCR產(chǎn)物可以清晰的分析和判斷實驗結(jié)果。
支原體檢測試劑盒檢測原理
支原體檢測試劑盒采用高靈敏性的PCR技術(shù)來進行支原體檢測。支原體的rRNA基因序列通常是高度保守的。而基因間的區(qū)域(如16S基因和23S基因之間)卻在不同亞種之間有著序列和長度的不同。整個PCR的反應(yīng)流程分為以下兩步:
步驟1:用一對引物(F1和R1)擴增16S和23S基因間區(qū)域。
步驟2:用第二對引物(F2和R2)進行巢式PCR。
本檢測方法不受其他來源(如所培養(yǎng)細胞)DNA的影響。采用巢式PCR的方法,不但提高了檢測的靈敏度,同時也提高了特異性。